..start..fly..

扫一扫
Guestbook

Home / Cell /Experiment / 总结一篇培养心肌细胞的同行经验

<< Large-Scale Mutagenesis in p19ARF- and p53-Deficient Mice Identifies Cancer Genes and Their Collaborative Networks很好的适合初学者的细胞培养基本操作技术 >>

总结一篇培养心肌细胞的同行经验,这里好比备忘录式的,所以没有人称的区别了。

40h心肌细胞已经贴壁了,换液不会将细胞换掉的,一般48h搏动现象就比较明显了。辨别心肌细胞与成纤维细胞除了观察有无搏动,还可通过免疫细化的方法加以区别。

建议调整消化步骤,当然首先要保证取材快,我取出心脏时,洗心脏时,不用我去碰,都会自己喷血。乳鼠2天的好,1天和3天,我认为不行。胎鼠的我也养过,还是养神经元比较好。

细胞需要差速贴壁培养,因为消化后有心肌成纤维细胞和心肌细胞,成纤维细胞2小时就贴壁完成,因此可以通过差速贴壁的方式,让成纤维先贴壁然后吸上清再种到一个新的平皿,预先铺明胶促进贴壁!

首先用0.8%胰酶4度消化过夜 第二天用胶原酶34度消化就可以。

你养得是什么心肌细胞啊,要消化这么久,我都是出生24小时的SD大鼠,最多消化半小时吧,还用得0.025%的胰酶,4度过夜,效果很好。也是SD大鼠,小鼠也是这个条件.

我想问下,细胞搏动是如何判断的,是要一簇细胞一起搏动还是单个细胞都能搏动呢?还有想请问下大家,取原代的时候撕去了心包膜了么?因为心包膜里的纤维细胞较多,但是这个步骤不好操作啊

有单个细胞的搏动也有成簇的搏动,个人认为成簇的搏动更具有说服力。
尽量撕去心包膜吧,如果弄不干净的话1.5-2小时的差速或通过添加Brdu也可将大部分的成纤维细胞去除。

搏动是很明显的 整体一起搏 不过不处理确实不是很厉害 如果用PE处理就使劲动呵呵,从图上看挺象的,成纤维细胞是典型的梭状

我就是用含BRDU的培养基 差速贴壁2小时,效果很好

我是用的37度水浴,多次消化,效果很好。

请问PE是啥啊?BRDU的性状是如何的?粉末还是液体呢,贵不,我们实验经费有限啊

PE苯肾上腺素(phenylephrine)要看自己实验的情况,在这里仅仅是给予心肌细胞一种处理或刺激因素,要根据自己的实验设计来,没必要添加。

Related Posts

转载原创文章请注明,转载自:SKY..fly..[www.sky.gs]

本文链接: https://www.sky.gs/experiment/the-experience-of-a-cultured-cardiac-muscle-cells.html

QR:  总结一篇培养心肌细胞的同行经验

Leave a Reply

Code (☆)3+10=?


Websites powered by Wordpress5.7 Copyright © 2009-2021 - All Rights Reserved   SKY..fly..