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深部真菌感染的诊断主要依赖于病原学检查,包括病原真菌直接镜检、培养和组织病理学检查,但这些方法灵敏度差,耗时久,难以满足临床需要。快速、敏感、特异性高和非侵袭性检测技术为近年研究的目标。近年来,一些替代指标主要用于检测真菌的抗原、细胞壁成分和特异性核酸,对深部真菌感染的诊断有一定辅助作用。

血清学诊断方法应用免疫和生化的方法检测血清和其他体液中的真菌细胞壁和胞质抗原,如检测新型隐球菌和荚膜组织胞浆菌的多糖抗原,用于隐球菌脑膜炎和播散性组织胞浆菌病的快速诊断。检测体液中的巴西副球孢子菌抗原,可用于副球孢子菌病的诊断和随访。特异性抗体检测可用于诊断地方性真菌病,例如芽生菌病、球孢子菌病、组织胞浆菌病、副球孢子菌病和青霉病。最有价值者为半乳甘露聚糖(galactomannan ,GM) 和(1 ,3)-β-D-葡聚糖(glucan) 的检测。

一.GM 检测:亦称GM 试验。

GM 为曲霉细胞壁的特异性细胞壁多糖成分,一般于发病5~8 d 后开始增高,侵袭性曲霉病时可自血液、支气管肺泡灌洗液和脑脊液中检测。GM 试验用于造血干细胞移植受者和血液系统恶性疾病患者侵袭性曲霉病的诊断,亦可用于判断病情、评估治疗反应。灵敏度为80 . 7 %,特异度为89 . 2 %。连续2 次以上阳性结果的特异度提高。阳性标准为检测值≥0. 5 。但本试验结果可受到真菌感染部位、真菌释出GM 的量、使用抗真菌药和某些抗菌药以及某些食物等因素的影响。使用哌拉西林-他唑巴坦、阿莫西林2克拉维酸患者也可能出现假阳性 。

二.(1 ,3)-β-D 葡聚糖检测:也称G 试验或B G 试验。

(1 ,3)-β-D 葡聚糖为真菌细胞壁成分,可在念珠菌属、曲霉属、毛孢子属、镰刀属、枝顶孢属和酵母属等所致侵袭性真菌感染患者血清中存在。G试验用于血液系统恶性肿瘤患者深部真菌感染和真菌血症的诊断,除接合菌和隐球菌外多种侵袭性真菌感染都可能为阳性,可用于血液、支气管肺泡灌洗液、脑脊液的检测,灵敏度67 %~100 %,特异度90 % ,连续2 次阳性时特异度增至96 %。阴性预测值100 %。临床研究显示正常人群中浓度一般<10 pg/ mL ,均值一般为2. 7 pg/ mL ,而真菌感染患者则浓度一般> 20 pg/ mL 。G 试验阳性对诊断真菌感染并无特异性,仍应进行其他确证试验和真菌鉴定。体液中的蛋白酶可干扰检测结果。输注白蛋白或球蛋白、血液透析、输注抗肿瘤的多糖类药等可出现假阳性。迄今, G 试验并未在儿科和实体器官移植患者进行评价。

GM 试验和G 试验联合用于诊断侵袭性曲霉病时特异度达100 % ,阳性预测值达100 %,但需除外影响灵敏度和阴性预测值的因素。G试验一般早于GM 试验出现阳性结果。

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